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• 一、青霉素發(fā)酵的方法和步驟是什么？
• 二、超聲波逆流提取機組是否能提取甜葉菊。
• 三、哈爾濱樂泰藥業(yè)旗下有多少個分公司
• 四、三級逆流混合澄清萃取設備流程原理

一、青霉素發(fā)酵的方法和步驟是什么？

什么叫生物制藥呢？生物制藥的藥物來源是什么呢？
生物藥物是指運用微生物學、生物學、醫(yī)學、生物化學等的研究成果，從生物體、生物組織、細胞、體液等，綜合利用微生物學、化學、生物化學、生物技術、藥學等科學的原理和方法制造的一類用于預防、治療和診斷的制品。生物藥物原料以天然的生物材料為主，包括微生物、人體、動物、植物、海洋生物等。隨著生物技術的發(fā)展，有目的人工制得的生物原料成為當前生物制藥原料的主要來源。如用免疫法制得的動物原料、改變基因結構制得的微生物或其它細胞原料等。生物藥物的特點是藥理活性高、毒副作用小，營養(yǎng)價值高。生物藥物主要有蛋白質、核酸、糖類、脂類等。這些物質的組成單元為氨基酸、核苷酸、單糖、脂肪酸等，對人體不僅無害而且還是重要的營養(yǎng)物質。生物藥物的陣營很龐大，發(fā)展也很快。
目前全世界的醫(yī)藥品已有一半是生物合成的，特別是合成分子結構復雜的藥物時，它不僅比化學合成法簡便，而且有更高的經濟效益。
半個世紀以來微生物轉化在藥物研制中一系列突破性的應用給醫(yī)藥工業(yè)創(chuàng)造了巨大的醫(yī)療價值和經濟效益。微生物制藥工業(yè)生產的特點是利用某種微生物以“純種狀態(tài)”，也就是不僅“種子”要優(yōu)而且只能是一種，如其它菌種進來即為雜菌。對固定產品來說，一定按工藝有它最合適的“飯”—培養(yǎng)基，來供它生長。培養(yǎng)基的成分不能隨意更改，一個菌種在同樣的發(fā)酵培養(yǎng)基中，因為只少了或多了某個成分，發(fā)酵的成品就完全不同。如金色鏈霉菌在含氯的培養(yǎng)基中可形成金霉素，而在沒有氯化物或在培養(yǎng)基中加入抑制生成氯化的物質，就產生四環(huán)素。藥物生產菌投入發(fā)酵罐生產，必須經過種子的擴大制備。從保存的菌種斜面移接到搖瓶培養(yǎng)，長好的搖瓶種子接入培養(yǎng)量大的種子罐中，生長好后可接入發(fā)酵罐中培養(yǎng)。不同的發(fā)酵規(guī)模亦有不同的發(fā)酵罐，如10噸、30噸、50噸、100噸，甚至更大的罐。這如同我們作飯時用的大小不同的鍋。
我們吃的維生素、紅霉素、潔霉素等，注射用的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等就是用不同微生物發(fā)酵制得的。醫(yī)藥上已應用的抗生素絕大多數來自微生物，每個產品都有嚴格的生產標準。預測生物制藥的研究進展，它將廣泛用于治療癌癥、艾滋病、冠心病、貧血、發(fā)育不良、糖尿病等多種疾病。提示：與發(fā)酵有關的企業(yè)包括：

制藥業(yè)：抗生素、氨基酸、維生素的生產廠家；

食品業(yè)：醋、醬油、醬、酒等的生產廠家；

輕工業(yè)：檸檬酸、乳酸、味精、肌苷酸、干酵母、色素、黃原膠、甘油等的生產廠家；

化工業(yè)：酒精、丙酮、丁醇、衣康酸、丙烯酰胺和聚丙烯酰胺等的生產廠家；

飼料業(yè)：飼料添加劑的生產廠家；

農藥業(yè)：農用抗生素、微生物肥料、微生物農藥等的生產廠家。

五、參考資料

1.利用微生物發(fā)酵可以生產哪些產品？

利用微生物發(fā)酵生產的產品包括：

酒類，如果酒（葡萄酒等）、米酒、白酒等；

有機溶劑，如乙醇、丙酮、丁醇、甘油；

有機酸，如醋酸、乳酸、葡萄糖酸、檸檬酸、酒石酸、衣康酸、長鏈二元酸（以十三到十八碳的直鏈烷烴為原料的發(fā)酵產品）；

氨基酸，如谷氨酸（單谷氨酸鈉又稱味精）、賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、精氨酸、絲氨酸、丙氨酸、酪氨酸、蘇氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸等；

核苷酸及其類似物，如鳥嘌呤核苷酸（5’-GMP）、肌苷酸（5’-IMP）、腺嘌呤核苷酸（5’-AMP）、黃嘌呤核苷酸（5’-XMP）等；

抗生素，包括疾病治療的藥用抗生素，農業(yè)和畜牧業(yè)用于防病抗病的抗生素，如青霉素、頭孢霉素、鏈霉素、四環(huán)素、土霉素、紅霉素、稻瘟素、井崗霉素、春日霉素等等；

多糖，如黃原膠、普魯蘭等；

酶，如堿性蛋白酶（洗滌劑）、中性蛋白酶（洗滌劑等）、脂肪酶（洗滌劑）、α-淀粉酶（淀粉水解）、葡萄糖淀粉酶（葡萄糖生產）、葡萄糖異構酶（高果糖糖漿生產）、纖維素酶（纖維素水解、紡織品加工）、果膠酶（食品、水果加工等）、凝乳酶（奶酪制造）、青霉素酰化酶（青霉素母核生產）、天冬氨酸酶（L 天冬氨酸制造）、延胡索酸酶（L 蘋果酸制造）、葡萄糖氧化酶（檢驗葡萄糖）、乳酸脫氫酶（臨床檢驗）、鏈激酶（治療血栓）等等，目前世界上有100多種酶用微生物發(fā)酵生產，應用于不同領域。

2.如何選育菌種？

為了獲得適合大規(guī)模工業(yè)生產所需的優(yōu)良生產菌種，一般首先是從自然界分離篩選具有產生目標產物能力的菌種，但這樣獲得的菌種的生產能力往往較低，生理生化特性不一定能滿足生產要求，還需要進行大量的誘變選育，進一步提高其生產能力，改善性能；也可以對現(xiàn)有的生產菌種進行改造，即經誘變育種，選育出符合實際生產需要的菌株。

自然界中微生物資源異常豐富，土壤、水、空氣、腐敗的動植物殘骸，都是微生物的主要集居和生長繁衍的場所。其種類之多，至今仍然是一個難于估測的未知數。以其集居環(huán)境（包括特殊和極端環(huán)境）、營養(yǎng)類型、生存方式、生理類型、代謝途徑、合成能力等比較，均居生物界之冠。因此，微生物資源的開發(fā)和應用是當今世界矚目的重大課題。

菌種的分離，不僅是把混雜的各類微生物有效地分開，得到純種，更重要的是依著生產實際的要求，有的放矢、快速、準確地將能產生所需產物，或具有某種生化反應性能的菌種，從大量的微生物中挑選出來。有時是設計一種在分離階段便能識別所需菌種的方法，更多的是利用特定的方法分離，獲得所需菌種后，再進行識別。為了使獲得的菌種能滿足工業(yè)生產的需要，須考慮各種性能指標。因此，菌種分離和篩選的方法和策略就十分重要。

一般的菌種分離純化和篩選步驟可分為采樣、增殖與分離、發(fā)酵與性能測定等幾個步驟。步驟和方法如下圖所示：

3.發(fā)酵培養(yǎng)基如何配制？

首先需了解微生物需要的營養(yǎng)物質。

（1）微生物需要的營養(yǎng)物質

營養(yǎng)物質應滿足微生物的生長、繁殖和完成各種生理活動的需要。它們的作用可概括為形成結構（參與細胞組成）、提供能量和調節(jié)作用（構成酶的活性和物質運輸系統(tǒng)）。

微生物的營養(yǎng)物質有六大類要素，即水、碳源、氮源、無機鹽、生長因子和能源。

① 水

水是微生物的重要組成部分，在代謝中占有重要地位。水在細胞中有兩種存在形式：結合水和游離水。結合水與溶質或其他分子結合在一起，很難加以利用。游離水（或稱為非結合水）則可以被微生物利用。

② 碳源

碳在細胞的干物質中約占50%，所以微生物對碳的需求最大。凡是作為微生物細胞結構或代謝產物中碳架來源的營養(yǎng)物質，稱為碳源。

作為微生物營養(yǎng)的碳源物質種類很多，從簡單的無機物（CO2、碳酸鹽）到復雜的有機含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂類、醇類、有機酸、芳香化合物及各種含碳化合物等）。但不同微生物利用碳源的能力不同，假單孢菌屬可利用90種以上的碳源，甲烷氧化菌僅利用兩種有機物：甲烷和甲醇，某些纖維素分解菌只能利用纖維素。

大多數微生物是異養(yǎng)型，以有機化合物為碳源。能夠利用的碳源種類很多，其中糖類是最好的碳源。

異養(yǎng)微生物將碳源在體內經一系列復雜的化學反應，最終用于構成細胞物質，或為機體提供生理活動所需的能量。所以，碳源往往也是能源物質。

自養(yǎng)菌以CO2、碳酸鹽為唯一或主要的碳源。CO2是被徹底氧化的物質，其轉化成細胞成分是一個還原過程。因此，這類微生物同時需要從光或其他無機物氧化獲得能量。這類微生物的碳源和能源分別屬于不同物質。

③ 氮源

凡是構成微生物細胞的物質或代謝產物中氮元素來源的營養(yǎng)物質，稱為氮源。細胞干物質中氮的含量僅次于碳和氧。氮是組成核酸和蛋白質的重要元素，氮對微生物的生長發(fā)育有著重要作用。從分子態(tài)的N2到復雜的含氮化合物都能夠被不同微生物所利用，而不同類型的微生物能夠利用的氮源差異較大。

固氮微生物能利用分子態(tài)N2合成自己需要的氨基酸和蛋白質，也能利用無機氮和有機氮化物，但在這種情況下，它們便失去了固氮能力。此外，有些光合細菌、藍藻和真菌也有固氮作用。

許多腐生細菌和動植物的病原菌不能固氮，一般利用銨鹽或其他含氮鹽作氮源。硝酸鹽必須先還原為NH+4后，才能用于生物合成。以無機氮化物為唯一氮源的微生物都能利用銨鹽，但它們并不都能利用硝酸鹽。

有機氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米漿等，工業(yè)上能夠用黃豆餅粉、花生餅粉和魚粉等作為氮源。有機氮源中的氮往往是蛋白質或其降解產物。

氮源一般只提供合成細胞質和細胞中其他結構的原料，不作為能源。只有少數細菌，如硝化細菌利用銨鹽、硝酸鹽作氮源和能源。

④ 無機鹽

無機鹽也是微生物生長所不可缺少的營養(yǎng)物質。其主要功能是：① 構成細胞的組成成分；② 作為酶的組成成分；③ 維持酶的活性；④ 調節(jié)細胞的滲透壓、氫離子濃度和氧化還原電位；⑤ 作為某些自氧菌的能源。

磷、硫、鉀、鈉、鈣、鎂等鹽參與細胞結構組成，并與能量轉移、細胞透性調節(jié)功能有關。微生物對它們的需求量較大（10-4～10-3 mol/L），稱為“宏量元素”。沒有它們，微生物就無法生長。鐵、錳、銅、鈷、鋅、鉬等鹽一般是酶的輔因子，需求量不大（10-8～10-6 mol/L），所以，稱為“微量元素”。不同微生物對以上各種元素的需求量各不相同。鐵元素介于宏量和微量元素之間。

在配制培養(yǎng)基時，可通過添加有關化學試劑來補充宏量元素，其中首選是K2HPO4和MgSO4，它們可提供需要量很大的元素：K、P、S和Mg。微量元素在一些化學試劑、天然水和天然培養(yǎng)基組分中都以雜質等狀態(tài)存在，在玻璃器皿等實驗用品上也有少量存在，所以，不必另行加入。

⑤ 生長因子

一些異養(yǎng)型微生物在一般碳源、氮源和無機鹽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)不能生長或生長較差。當在培養(yǎng)基中加入某些組織（或細胞）提取液時，這些微生物就生長良好，說明這些組織或細胞中含有這些微生物生長所必須的營養(yǎng)因子，這些因子稱為生長因子。

生長因子可定義為：某些微生物本身不能從普通的碳源、氮源合成，需要額外少量加入才能滿足需要的有機物質，包括氨基酸、維生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物，有時也包括一些脂肪酸及其他膜成分%A

二、超聲波逆流提取機組是否能提取甜葉菊。

理論上可以提取，但實際操作只在國外一些機構發(fā)現(xiàn)使用，效果如何還不是太清楚。



三、哈爾濱樂泰藥業(yè)旗下有多少個分公司

哈爾濱樂泰藥業(yè)有限公司創(chuàng)建于1996年，被黑龍江省科技廳授予“高新技術企業(yè)”稱號，并全面通過國家GMP認證，是國內集現(xiàn)代化中藥、化藥、保健藥、臨床藥、醫(yī)療器械等研究、開發(fā)、生產、銷售、服務，五位一體的高科技現(xiàn)代化制藥企業(yè)。從2003年開始，連續(xù)11年成為呼蘭區(qū)納稅大戶，是哈爾濱市“民營企業(yè)納稅50強”之一。
企業(yè)位于哈爾濱市利民經濟技術開發(fā)區(qū)北京路中段，占地面積4萬平方米?？偨ㄖ娣e達48000平方米，主要廠房建筑面積23000平方米。2012年成為北京路地標性建筑的17層信息化綜合培訓辦公大樓正式投入使用，建筑面積達17000平方米。
企業(yè)生產一線有5個車間，8條生產線。擁有以國內外先進制藥企業(yè)為樣板，具有國內外先進一流水平的精良制藥設備197臺（套），保證生產高質量產品的需要。配備精密分析、檢驗儀器46臺（套），能按藥典規(guī)定完成各項檢測工作。保證產品質量控制和新產品研發(fā)處于行業(yè)內的高水平。
企業(yè)的領導層由精通行業(yè)規(guī)律的醫(yī)藥科技人才、管理與銷售人才組成，認真貫徹“重人才、嚴管理、深開發(fā)、創(chuàng)效益”的治企方針，現(xiàn)有員工2800余人，在公司內從事生產、管理的專業(yè)技術人才占總部人員總數的33%，藥學專業(yè)技術人才占總部人員總數的25%。其中自主培養(yǎng)中高層骨干人員達到62.5%以上，有11%的員工在企業(yè)連續(xù)工作5年以上。完善的用人機制，人性化的管理思路穩(wěn)定了高素質的人才隊伍，保證了企業(yè)在創(chuàng)新中得以迅速發(fā)展。
企業(yè)擁有自主知識產權等無形資產不斷增值。企業(yè)生產的自主研發(fā)產品包括藥品、醫(yī)療器械、消毒產品、保健食品、化妝品、食品等六大類，16種劑型近百余個產品。產品系列包括“亮甲”系列、“康角丫”系列、“甘樂保”系列、“香角丫”、“升甲”系列等十余個系列。
“香角丫”、“康角丫”品牌被認定為黑龍江省著名商標，“亮甲”品牌已經榮獲“中國馳名商標”、 “黑龍江省著名商標”，“哈爾濱著名商標”，榮獲了中國醫(yī)藥產業(yè)部頒發(fā)的“中國外用藥十大品牌”及“中國亮甲市場消費者首選品牌”、黑龍江省“高新技術產品”等稱號。此外，膽利舒膠囊獲中國商業(yè)聯(lián)合會頒發(fā)的“科技進步一等獎”和“國家產品發(fā)明專利”；亮甲、蛭丹絡活膠囊、膽利舒膠囊榮獲黑龍江省“高新技術產品”稱號，同時獲得黑龍江省“優(yōu)秀新產品”獎；“香角丫”系列產品被中國市場監(jiān)測中心、中國市場研究中心評為“中國醫(yī)藥產品治腳氣十大用戶滿意產品”。
2000年，獨立研發(fā)出高科技“亮甲”品牌系列產品，獨創(chuàng)了治愈灰指甲的“新三段療法”，解決灰指甲治愈難、治愈慢的世界性難題。十四年來，“亮甲”產品對灰指甲的治愈率達到85%以上，目前，“亮甲” 全國同行排名第一，成為國內治療灰指甲的第一品牌。
哈爾濱樂泰藥業(yè)已經形成具有“樂泰特色”的管理經營模式及企業(yè)文化，靈活運用到企業(yè)管理、生產管理、市場管理、研發(fā)管理等各個領域，用認真嚴謹、求實創(chuàng)新的工作作風，以“興企、富家、康民、報國”為使命，面向國內外市場，必將為社會主義物質文明、精神文明建設，為中國醫(yī)藥產業(yè)發(fā)展壯大，為成就人類健康、美麗事業(yè)做出更大的貢獻

四、三級逆流混合澄清萃取設備流程原理

三級逆流混合澄清萃取設備流程原理如下：
1、利用螺旋柱在行星運動時產生的多維離心力場。
2、使互不相溶的兩相不斷混合，同時保留其中的一相（固定相），利用恒流泵連續(xù)輸入另一相（流動相）。
3、隨流動相進入螺旋柱的溶質在兩相之間反復分配，按分配系數的次序，被依次萃取分離出。
4、在流動相中分配比例大的先被洗脫，反之，在固定相中分配比例大的后被洗脫，從而實現(xiàn)分離。

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